dor_id: 1501433

506.#.#.a: Público

650.#.4.x: Biología y Química

336.#.#.b: other

336.#.#.3: Registro de colección de proyectos

336.#.#.a: Registro de colección universitaria

351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)

351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales

harvesting_group: ColeccionesUniversitarias

270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

590.#.#.c: Otro

270.#.#.d: MX

270.1.#.d: México

590.#.#.b: Concentrador

883.#.#.u: https://datosabiertos.unam.mx/

883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

590.#.#.a: Administración central

883.#.#.1: http://www.ccud.unam.mx/

883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios

850.#.#.a: Universidad Nacional Autónoma de México

856.4.0.u: http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN221011

100.1.#.a: José Alejandro Sandoval Romero

524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

720.#.#.a: José Alejandro Sandoval Romero

245.1.0.a: Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal

502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México

561.1.#.a: Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM

264.#.0.c: 2011

264.#.1.c: 2011

307.#.#.a: 2019-05-23 18:40:21.491

653.#.#.a: Fisiología de los canales de calcio dependientes de voltaje; Fisiología

506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2011, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx

041.#.7.h: spa

500.#.#.a: La síntesis y secreción de prolactina son procesos que dependen de la actividad de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje (CaVs) de los lactotropos. En estas células los cambios del potencial de membrana ocasionan la apertura de los canales CaV y con ello un incremento brusco de la concentración de Ca2+ intracelular lo que provoca la activación de vías de señalización que conducen a la movilización de las vesículas de secreción, su aproximación y fusión a la membrana celular, para finalmente vaciar su contenido en el espacio extracelular. La regulación de la secreción de prolactina se ha estudiado en una línea celular derivada de un adenoma hipofisiario de la rata denominada GH3 en la que se han reconocido diferentes factores que promueven o inhiben su liberación por medio de modificar la actividad de los canales CaV. Entre estos, se ha visto que la insulina favorece la secreción de prolactina por medio de incrementar la expresión funcional de los canales CaV de bajo umbral de activación (LVA o tipo T). Existen evidencias de que este efecto pudiera ser postraduccional, sin embargo, hasta el momento se desconocen los mecanismos moleculares que determinan el incremento de la corriente de tipo T causado por la insulina. _x000D_ Considerando que el reciclaje de los canales iónicos en general y de canales de Ca2+en particular es un mecanismo para regular su número en la membrana celular, estudios recientes han propuesto que el aumento en el reciclamiento de los canales endocitados en vesículas pudiera mediar algunos de los procesos que incrementan la expresión funcional de dichos canales. Precisamente, el propósito central de este trabajo es investigar la participación del reciclamiento de canales de Ca2+ de tipo T en las células GH3 durante la secreción de prolactina estimulada por insulina. En este sentido se ha mostrado que las GTPasas pequeñas de la familia Rab son elementos cruciales de la maquinaria que controla el reciclamiento de proteínas hacia la membrana celular, y entre ellas se ha destacado el papel de Rab11 en la reincorporación de los canales de Ca2+ cardiacos y neuronales. _x000D_ En la primera fase de este trabajo se caracterizará el efecto de la insulina sobre la secreción de prolactina en las células GH3, y se confirmará la expresión de canales T (CaV3.1), Rab 11 y del receptor a insulina en esta línea celular. Simultáneamente se obtendrá una construcción de los canales T recombinantes CaV3.1 con un epítope de hemaglutinina (CaV3.1-HA), por medio de la cual se dará seguimiento a este tipo de canales durante su expresión heteróloga. En la segunda fase de la presente investigación, se expresarán dos mutaciones de Rab11 en células HEK-293 junto con canales CaV3.1-HA, para definir si el incremento de la corriente T inducido por la insulina depende de un aumento en el número de canales reciclados a la membrana celular. _x000D_ La hipótesis de la presente propuesta predice que el uso de una dominante positiva de Rab11, la mutante Q70L podría favorecer la reinserción de canales a la membrana celular. En contraste, la expresión de la mutante dominante negativa S25N podría prevenir el incremento de la corriente T en células tratadas con insulina. Los efectos de las mutantes de Rab11 se definirán por medio de las técnicas de citometría de flujo y patch-clamp. En la fase final de la investigación, para confirmar la relevancia de Rab11 en la secreción hormonal en las células GH3 se usarán ARNs pequeños de interferencia (siRNAs) para el silenciamiento del gen que codifica la proteína y de esta manera reducir el reciclamiento de los canales nativos. El silenciamiento de Rab11 se confirmará por Western-blot y sus efectos sobre el reciclamiento de canales de tipo T se analizarán por medio de la técnica de patch-clamp._x000D_ Hasta el momento pocos estudios se han enfocado a investigar la relevancia del reciclamiento de canales iónicos, incluso se ha llegado a dudar que los canales CaV puedan ser reinsertados en la membrana celular después de ser removidos. Considerando lo anterior, identificar al reciclamiento de los canales T como un mecanismo involucrado en la regulación de procesos fisiológicos tan relevantes como la secreción hormonal podría abrir nuevos horizontes en estudios de fisiología y endocrinología molecular._x000D_

046.#.#.j: 2019-11-14 12:26:40.706

264.#.1.b: Dirección General de Asuntos del Personal Académico

handle: 00cc1a18a0e8bedd

harvesting_date: 2019-11-14 12:26:40.706

856.#.0.q: text/html

last_modified: 2019-11-22 00:00:00

license_url: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es

license_type: by

No entro en nada

No entro en nada 2

Registro de colección universitaria

Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal

Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

Licencia de uso

Procedencia del contenido

Entidad o dependencia
Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM
Entidad o dependencia
Dirección General de Asuntos del Personal Académico
Acervo
Colecciones Universitarias Digitales
Repositorio
Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
Contacto
Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

Cita

Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

Descripción del recurso

Título
Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal
Colección
Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
Responsable
José Alejandro Sandoval Romero
Fecha
2011
Descripción
La síntesis y secreción de prolactina son procesos que dependen de la actividad de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje (CaVs) de los lactotropos. En estas células los cambios del potencial de membrana ocasionan la apertura de los canales CaV y con ello un incremento brusco de la concentración de Ca2+ intracelular lo que provoca la activación de vías de señalización que conducen a la movilización de las vesículas de secreción, su aproximación y fusión a la membrana celular, para finalmente vaciar su contenido en el espacio extracelular. La regulación de la secreción de prolactina se ha estudiado en una línea celular derivada de un adenoma hipofisiario de la rata denominada GH3 en la que se han reconocido diferentes factores que promueven o inhiben su liberación por medio de modificar la actividad de los canales CaV. Entre estos, se ha visto que la insulina favorece la secreción de prolactina por medio de incrementar la expresión funcional de los canales CaV de bajo umbral de activación (LVA o tipo T). Existen evidencias de que este efecto pudiera ser postraduccional, sin embargo, hasta el momento se desconocen los mecanismos moleculares que determinan el incremento de la corriente de tipo T causado por la insulina. _x000D_ Considerando que el reciclaje de los canales iónicos en general y de canales de Ca2+en particular es un mecanismo para regular su número en la membrana celular, estudios recientes han propuesto que el aumento en el reciclamiento de los canales endocitados en vesículas pudiera mediar algunos de los procesos que incrementan la expresión funcional de dichos canales. Precisamente, el propósito central de este trabajo es investigar la participación del reciclamiento de canales de Ca2+ de tipo T en las células GH3 durante la secreción de prolactina estimulada por insulina. En este sentido se ha mostrado que las GTPasas pequeñas de la familia Rab son elementos cruciales de la maquinaria que controla el reciclamiento de proteínas hacia la membrana celular, y entre ellas se ha destacado el papel de Rab11 en la reincorporación de los canales de Ca2+ cardiacos y neuronales. _x000D_ En la primera fase de este trabajo se caracterizará el efecto de la insulina sobre la secreción de prolactina en las células GH3, y se confirmará la expresión de canales T (CaV3.1), Rab 11 y del receptor a insulina en esta línea celular. Simultáneamente se obtendrá una construcción de los canales T recombinantes CaV3.1 con un epítope de hemaglutinina (CaV3.1-HA), por medio de la cual se dará seguimiento a este tipo de canales durante su expresión heteróloga. En la segunda fase de la presente investigación, se expresarán dos mutaciones de Rab11 en células HEK-293 junto con canales CaV3.1-HA, para definir si el incremento de la corriente T inducido por la insulina depende de un aumento en el número de canales reciclados a la membrana celular. _x000D_ La hipótesis de la presente propuesta predice que el uso de una dominante positiva de Rab11, la mutante Q70L podría favorecer la reinserción de canales a la membrana celular. En contraste, la expresión de la mutante dominante negativa S25N podría prevenir el incremento de la corriente T en células tratadas con insulina. Los efectos de las mutantes de Rab11 se definirán por medio de las técnicas de citometría de flujo y patch-clamp. En la fase final de la investigación, para confirmar la relevancia de Rab11 en la secreción hormonal en las células GH3 se usarán ARNs pequeños de interferencia (siRNAs) para el silenciamiento del gen que codifica la proteína y de esta manera reducir el reciclamiento de los canales nativos. El silenciamiento de Rab11 se confirmará por Western-blot y sus efectos sobre el reciclamiento de canales de tipo T se analizarán por medio de la técnica de patch-clamp._x000D_ Hasta el momento pocos estudios se han enfocado a investigar la relevancia del reciclamiento de canales iónicos, incluso se ha llegado a dudar que los canales CaV puedan ser reinsertados en la membrana celular después de ser removidos. Considerando lo anterior, identificar al reciclamiento de los canales T como un mecanismo involucrado en la regulación de procesos fisiológicos tan relevantes como la secreción hormonal podría abrir nuevos horizontes en estudios de fisiología y endocrinología molecular._x000D_
Tema
Fisiología de los canales de calcio dependientes de voltaje; Fisiología
Identificador global
http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN221011

Enlaces