dor_id: 1501284
506.#.#.a: Público
650.#.4.x: Biología y Química
336.#.#.b: other
336.#.#.3: Registro de colección de proyectos
336.#.#.a: Registro de colección universitaria
351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales
harvesting_group: ColeccionesUniversitarias
270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx
590.#.#.c: Otro
270.#.#.d: MX
270.1.#.d: México
590.#.#.b: Concentrador
883.#.#.u: https://datosabiertos.unam.mx/
883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
590.#.#.a: Administración central
883.#.#.1: http://www.ccud.unam.mx/
883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios
850.#.#.a: Universidad Nacional Autónoma de México
856.4.0.u: http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN214411
100.1.#.a: María Gloria Soldevila Melgarejo
524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Papel de las Inhibinas en la diferenciación, maduración y función de células dendríticas y su efecto en la generación de células T reguladoras naturales e inducidas", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.
720.#.#.a: María Gloria Soldevila Melgarejo
245.1.0.a: Papel de las Inhibinas en la diferenciación, maduración y función de células dendríticas y su efecto en la generación de células T reguladoras naturales e inducidas
502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México
561.1.#.a: Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM
264.#.0.c: 2011
264.#.1.c: 2011
307.#.#.a: 2019-05-23 18:40:21.491
653.#.#.a: Desarrollo y activación de linfocitos T; Biomedicina
506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2011, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx
041.#.7.h: spa
500.#.#.a: Las Activinas e Inhibinas son ligandos dimericos (ββ y αβ, respectivamente) miembros de la superfamilia del TGFβ, y tienen un papel crucial en la regulación de distintos procesos celulares tales como diferenciación, proliferación, apoptosis, ciclo celular, migración, etc. Nuestro grupo ha investigado el papel de las Activinas/Inhibinas en el proceso de desarrollo de los linfocitos T en el timo, reportando que éstas regulan la diferenciación de timocitos en distintos estadios de maduración durante los procesos de selección y elección de linaje. Nuestro laboratorio ha reportado que estos ligandos se expresan abundantemente en el estroma tímico, que se encuentra constituido por distintos tipos celulares, incluyendo células epiteliales, macrófagos, fibroblastos y células dendríticas (DC). Además, de expresar los ligandos, el estroma tímico también expresa receptores tipo I y tipo II para Activinas (Alk4, ActRIIA), por lo que las células estromales pueden ser susceptibles a las señales inducidas por Activinas/Inhibinas. En base a esta evidencia, se postula que estos ligandos pudieran también regular la diferenciación de células dendríticas, las cuales representan un porcentaje elevado de las células presentes la médula tímica. Por otro lado, existen reportes que demuestran el papel de las Activinas en la diferenciación de las células de Langerhans en la epidermis, y existe evidencia que indica que las Activinas pueden modular la función de distintas células inmunes (monocitos, macrófagos, DCs, linfocitos T y B, mastocitos etc) en condiciones de homeostasis e inflamación. Puesto que las inhibinas son antagonistas por excelencia de las Activinas, postulamos que éstas podrían ser importantes reguladores de la diferenciación y función de células dendríticas convencionales. Las células dendríticas regulan la interfase entre inmunidad y tolerancia, por lo tanto el balance entre los efectos mediados por las Activinas e Inhibinas sobre las células dendríticas, podría tener un papel crucial en la regulación de la respuesta inmune. _x000D_
Esta propuesta tiene como objetivo principal evaluar el efecto de la ausencia de Inhibinas en la diferenciación, maduración y función de células dendríticas, tanto en el timo como en órganos linfoides periféricos. Debido al papel descrito para las DCs en la diferenciación de células T reguladoras, postulamos que la ausencia de Inhibina tendrá una repercusión en la generación de células T reguladoras tímicas y/o inducidas en periferia. Puesto que las Inhibinas comparten la cadena β con las Activinas, se postula que en ausencia de la cadena α, se generarán más homodímeros ββ, por lo que es probable que se incrementen los niveles de activinas. Ésto, en si mismo, podría tener una efecto en la maduración de células dendríticas y la generación de Tregs (exceso de señalización por Activinas). Sin embargo, no podemos excluir el efecto de la ausencia de señalización a través de las mismas Inhibinas, lo cual está apoyado por datos de nuestro laboratorio que indican que las Inhibinas pueden inducir la fosforilación de Smad2/3 en timocitos murinos, de manera independiente a las Activinas._x000D_
Para llevar a cabo este estudio, se analizarán las poblaciones de células dendríticas timicas y periféricas de ratones silvestres o Inhibin α ko (Inh α ko), mediante citofluorometría de flujo, así como mediante inmunohistoquímica. Para evaluar la función de las células dendríticas, se derivarán DC a partir de progenitores de médula ósea en presencia de GM-CSF, y se madurarán con LPS. A partir de Las células generadas in vitro se analizará su fenotipo, con anti- MHC Clase II, CD11c, CD80 y CD86, para evaluar su estado de maduración. Puesto que se ha demostrado el papel de las Activinas en procesos de migración, se analizará la capacidad migratoria de las DCs derivadas de MO de ratones Inh α ko o silvestres, y se llevarán a cabo experimentos de migración in vitro (ensayos de quimotaxis) e in vivo (ensayos de “homing” con DCs marcadas con “cell trackers”). Mediante la utilización de ratones transgénicos actin-GFP en fondo C57/BL6 y ratones transgénicos actin-YFP en fondo genético Inh α ko , se derivaran DCs a partir de progenitores de medula ósea, para realizar experimentos de migración competitiva. _x000D_
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También se caracterizará el efecto de la ausencia de Inhibinas sobre la morfología de las DC inmaduras y maduras derivadas de progenitores de MO silvestres y Inh α ko en condiciones basales, así como su fenotipo migratorio en respuesta a las quimiocinas CCL19 y CCL21, mediante el análisis de la formación de estructuras ricas en actina (lamellas y filopodios), así como el citoesqueleto de tubulina mediante microscopía confocal. _x000D_
Para demostrar la funcionalidad de las DCs, se realizarán ensayos de proliferación utilizando co-cultivos de DCs derivadas de MO de ratones silvestres o Inh α ko y linfocitos T alogénicos o bien singénicos en respuesta al entrecruzamiento de CD3+CD28. _x000D_
Para analizar la generación de Treg, se cruzarán los ratones Inh α ko con ratones Foxp3 knock-in, que expresan el factor transcripcional Foxp3 fusionado a la proteina verde fluorescente (GFP), lo cual permite identificar a las células T reguladoras in vivo. _x000D_
Para fenotipicar las células T reguladoras se realizará tinción múltiple con CD4, CD25, CTLA-4 y GITR. Se analizará la proporción y número de células Foxp3+ CD25+ (o CD25-) en el timo, ganglio y bazo de los ratones Inh α ko o silvestres (en fondo Foxp3 knockin) en condiciones basales, y se analizará la conversión de células T reg inducidas, a partir de células T vírgenes (CD4+ CD25- Foxp3-) a células T reguladoras (CD4+CD25+ Foxp3+) estimuladas con anti-CD3+CD28, en presencia de TGFβ y/o Activina exógena, en presencia o ausencia del inhibidor Folistatina, mediante la identificación de células GFP+(Foxp3+) en los co-cultivos y analisis por citofluorometría de flujo._x000D_
Finalmente, para investigar si las inhibinas pueden regular el ambiente inflamatorio a través de su influencia en la generación y maduración de células dendríticas in vivo, se analizará el infiltrado linfocitario y las DCs de ratones machos Inh a ko, donde se generan tumores en los testículos, lo cual nos servirá como modelo para evaluar la respuesta anti-tumoral in situ en ausencia de Inhibinas._x000D_
046.#.#.j: 2019-11-14 12:26:40.706
264.#.1.b: Dirección General de Asuntos del Personal Académico
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