dor_id: 1501373

506.#.#.a: Público

650.#.4.x: Medicina y Ciencias de la Salud

336.#.#.b: other

336.#.#.3: Registro de colección de proyectos

336.#.#.a: Registro de colección universitaria

351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)

351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales

harvesting_group: ColeccionesUniversitarias

270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

590.#.#.c: Otro

270.#.#.d: MX

270.1.#.d: México

590.#.#.b: Concentrador

883.#.#.u: https://datosabiertos.unam.mx/

883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

590.#.#.a: Administración central

883.#.#.1: http://www.ccud.unam.mx/

883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios

850.#.#.a: Universidad Nacional Autónoma de México

856.4.0.u: http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN218311

100.1.#.a: Armando Navarro Ocaña

524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Inmunógeno protector desarrollado a partir de epitopos del lipopolisacárido compartidos por diferentes enterobacterias", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

720.#.#.a: Armando Navarro Ocaña

245.1.0.a: Inmunógeno protector desarrollado a partir de epitopos del lipopolisacárido compartidos por diferentes enterobacterias

502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México

561.1.#.a: Facultad de Medicina, UNAM

264.#.0.c: 2011

264.#.1.c: 2011

307.#.#.a: 2019-05-23 18:40:21.491

653.#.#.a: Respuesta inmune contra patógenos entéricos; Biología celular y microbiología

506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2011, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx

041.#.7.h: spa

500.#.#.a: SINTESIS DEL PROYECTO_x000D_ En un estudio previo en el laboratorio en el que se utilizó el procedimiento de absorción de sueros de conejo y de bovinos con antígenos heterólogos, se identificó en el lipopolisacárido (LPS) de cepas de Escherichia coli O157, la presencia de epitopos compartidos entre esta bacteria y los serogrupos de E. coli O7 y O116, así como con las serovariedades Urbana y Arizona de Salmonella [35, 36]. Existen diferentes procedimientos para la detección de sitios inmunodominantes presentes en estructuras de bacterias, virus, proteínas etc. [33], uno de ellos que se ha utilizado con buenos resultados es el método de presentación de péptidos en fagos filamentosos conocido como Phage Display [47]. Con este método se han identificado mimotopos del LPS y de la pared celular de microorganismos como Shigella flexneri 5ª [10, 41]. De Bolle X [14] por su parte, reportó las propiedades antigénicas de mimotopos del LPS obtenidos por phage display, en cepas de Brucella abortus y Gevorkian G [23], identificó que mimotopos de componentes de la pared celular de Mycobacterium tuberculosis, eran reconocidos tanto por un suero obtenido en conejos inmunizados con la pared celular de la bacteria, como por el suero de pacientes con diagnóstico de tuberculosis. _x000D_ Estudios similares realizados con la misma metodología de phage display, se utilizaron para la selección de mimotopos del LPS de Vibrio cholerae O1 Ogawa y de la capsula de V. cholerae O139. Con los péptidos seleccionados se inmunizaron ratones y se observó tanto la producción de anticuerpos contra el LPS, como una respuesta inmune protectora la cual fue evaluada al retar a los animales con la bacteria viva [15, 16, 20]._x000D_ En el laboratorio existe experiencia en el empleo del método de Phage Display, este se utilizó en la identificación de epitopos inmunodominantes en las proteasas de serina Pet y Pic, ambas secretadas por E. coli y S. flexneri [26]. _x000D_ La propuesta del presente proyecto esta dirigida a la selección e identificación del o los mimótopos de los epitopos que previamente reportamos son compartidos entre E. coli O157, las serovariedades de S. Urbana, S. Arizonae y los serogrupos de E. coli O7 y O116 [35, 36]. Al identificar la composición y ubicación de estos epitopos, se puede evaluar su uso como inmunógenos potenciales con capacidad para inducir respuesta inmune protectora contra la colonización intestinal de los patógenos entéricos que comparten dichos epitopos. En el trabajo previo [35], en el que se identificó la presencia de epitopos compartidos entre diferentes enterobacterias, también se evaluó la actividad bactericida del suero policlonal de conejo obtenido contra E. coli O157, E. coli O7 y O116. En este ensayo se utilizaron las cepas homólogas y heterólogas, los resultados mostraron la presencia de anticuerpos bactericidas hecho que sugiere que la respuesta contra componentes del LPS tiene un efecto protector que pudiera interferir con la colonización intestinal de estas bacterias._x000D_ En una primera etapa del proyecto nos proponemos realizar la selección (biopanning) de mimótopos del LPS, esta se realizará con las IgG de sueros policlonales de conejo anti-LPS de E. coli O157 y una biblioteca de péptidos que son expresados en la proteína III del fago filamentoso M13 (Phage Display). Los fagotopos seleccionados (fagos portadores de la secuencia mimética de péptidos), se utilizaran para inmunizar conejos y evaluar si los anticuerpos generados reconocen el LPS de las bacterias en estudio (E. coli O157, O7 y O116 y las serovariedades de S. Urbana, S. Arizonae). Con el resultado en caso de ser positivo, los fagos se reproducirán para obtener el DNA de estos y conocer la secuencia de aminoácidos que corresponde al epitopo inmunodominate. A partir de la o las secuencias de aminoácidos obtenidas, se procederá a solicitar la síntesis de los péptidos correspondientes. _x000D_ Con los péptidos sintéticos se utilizaran para inmunizar conejos y obtener los anticuerpos respectivos para evaluar su inmuno-reactividad contra los LPS de diferentes enterobacterias. En esta fase también se analizará si el suero de conejo obtenido contra los diferentes LPS s reacciona contra los fagotopos seleccionados y los péptidos sintéticos, esto permitirá confirmar que la secuencia peptídica es mimotopo del epitopo que se está analizando._x000D_ Considerando los resultados obtenidos al respecto por otros investigadores [14, 15, 16, 20], se evaluará si los anticuerpos anti-péptidos obtenidos, muestran actividad de tipo protectora que se analizará mediante un ensayo de actividad bactericida. Además con los perfiles electroforéticos del LPS de E. coli O157, S. Urbana, S. Arizonae y los serogrupos de E. coli O7 y O116, se pretende identificar la región del LPS a la que pertenecen los mimotopos seleccionados._x000D_ Con los resultados obtenidos la siguiente fase del proyecto consistirá realizar ensayos in vitro y en modelo animal para demostrar que los anticuerpos anti-mimotopos del LPS O157 tienen la propiedad de neutralizar el efecto endotóxico de los LPS de diferentes enterobacterias. En forma conjunta se desarrollara un modelo animal de ensayos de desafío/protección empleando como inmunógenos los péptidos-mimotopos sintéticos del LPS O157. Los resultados positivos en estos ensayos confirmarán que se cuenta con un inmunógeno polivalente con propiedades inmunogénicas, con el que se podrá desarrollar una vacuna protectora contra enterobacterias de interés médico y epidemiológico._x000D_

046.#.#.j: 2019-11-14 12:26:40.706

264.#.1.b: Dirección General de Asuntos del Personal Académico

handle: 4ac7318441c4aea0

harvesting_date: 2019-11-14 12:26:40.706

856.#.0.q: text/html

last_modified: 2019-11-22 00:00:00

license_url: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es

license_type: by

No entro en nada

No entro en nada 2

Registro de colección universitaria

Inmunógeno protector desarrollado a partir de epitopos del lipopolisacárido compartidos por diferentes enterobacterias

Facultad de Medicina, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

Licencia de uso

Procedencia del contenido

Entidad o dependencia
Facultad de Medicina, UNAM
Entidad o dependencia
Dirección General de Asuntos del Personal Académico
Acervo
Colecciones Universitarias Digitales
Repositorio
Contacto
Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

Cita

Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Inmunógeno protector desarrollado a partir de epitopos del lipopolisacárido compartidos por diferentes enterobacterias", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

Descripción del recurso

Título
Inmunógeno protector desarrollado a partir de epitopos del lipopolisacárido compartidos por diferentes enterobacterias
Colección
Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
Responsable
Armando Navarro Ocaña
Fecha
2011
Descripción
SINTESIS DEL PROYECTO_x000D_ En un estudio previo en el laboratorio en el que se utilizó el procedimiento de absorción de sueros de conejo y de bovinos con antígenos heterólogos, se identificó en el lipopolisacárido (LPS) de cepas de Escherichia coli O157, la presencia de epitopos compartidos entre esta bacteria y los serogrupos de E. coli O7 y O116, así como con las serovariedades Urbana y Arizona de Salmonella [35, 36]. Existen diferentes procedimientos para la detección de sitios inmunodominantes presentes en estructuras de bacterias, virus, proteínas etc. [33], uno de ellos que se ha utilizado con buenos resultados es el método de presentación de péptidos en fagos filamentosos conocido como Phage Display [47]. Con este método se han identificado mimotopos del LPS y de la pared celular de microorganismos como Shigella flexneri 5ª [10, 41]. De Bolle X [14] por su parte, reportó las propiedades antigénicas de mimotopos del LPS obtenidos por phage display, en cepas de Brucella abortus y Gevorkian G [23], identificó que mimotopos de componentes de la pared celular de Mycobacterium tuberculosis, eran reconocidos tanto por un suero obtenido en conejos inmunizados con la pared celular de la bacteria, como por el suero de pacientes con diagnóstico de tuberculosis. _x000D_ Estudios similares realizados con la misma metodología de phage display, se utilizaron para la selección de mimotopos del LPS de Vibrio cholerae O1 Ogawa y de la capsula de V. cholerae O139. Con los péptidos seleccionados se inmunizaron ratones y se observó tanto la producción de anticuerpos contra el LPS, como una respuesta inmune protectora la cual fue evaluada al retar a los animales con la bacteria viva [15, 16, 20]._x000D_ En el laboratorio existe experiencia en el empleo del método de Phage Display, este se utilizó en la identificación de epitopos inmunodominantes en las proteasas de serina Pet y Pic, ambas secretadas por E. coli y S. flexneri [26]. _x000D_ La propuesta del presente proyecto esta dirigida a la selección e identificación del o los mimótopos de los epitopos que previamente reportamos son compartidos entre E. coli O157, las serovariedades de S. Urbana, S. Arizonae y los serogrupos de E. coli O7 y O116 [35, 36]. Al identificar la composición y ubicación de estos epitopos, se puede evaluar su uso como inmunógenos potenciales con capacidad para inducir respuesta inmune protectora contra la colonización intestinal de los patógenos entéricos que comparten dichos epitopos. En el trabajo previo [35], en el que se identificó la presencia de epitopos compartidos entre diferentes enterobacterias, también se evaluó la actividad bactericida del suero policlonal de conejo obtenido contra E. coli O157, E. coli O7 y O116. En este ensayo se utilizaron las cepas homólogas y heterólogas, los resultados mostraron la presencia de anticuerpos bactericidas hecho que sugiere que la respuesta contra componentes del LPS tiene un efecto protector que pudiera interferir con la colonización intestinal de estas bacterias._x000D_ En una primera etapa del proyecto nos proponemos realizar la selección (biopanning) de mimótopos del LPS, esta se realizará con las IgG de sueros policlonales de conejo anti-LPS de E. coli O157 y una biblioteca de péptidos que son expresados en la proteína III del fago filamentoso M13 (Phage Display). Los fagotopos seleccionados (fagos portadores de la secuencia mimética de péptidos), se utilizaran para inmunizar conejos y evaluar si los anticuerpos generados reconocen el LPS de las bacterias en estudio (E. coli O157, O7 y O116 y las serovariedades de S. Urbana, S. Arizonae). Con el resultado en caso de ser positivo, los fagos se reproducirán para obtener el DNA de estos y conocer la secuencia de aminoácidos que corresponde al epitopo inmunodominate. A partir de la o las secuencias de aminoácidos obtenidas, se procederá a solicitar la síntesis de los péptidos correspondientes. _x000D_ Con los péptidos sintéticos se utilizaran para inmunizar conejos y obtener los anticuerpos respectivos para evaluar su inmuno-reactividad contra los LPS de diferentes enterobacterias. En esta fase también se analizará si el suero de conejo obtenido contra los diferentes LPS s reacciona contra los fagotopos seleccionados y los péptidos sintéticos, esto permitirá confirmar que la secuencia peptídica es mimotopo del epitopo que se está analizando._x000D_ Considerando los resultados obtenidos al respecto por otros investigadores [14, 15, 16, 20], se evaluará si los anticuerpos anti-péptidos obtenidos, muestran actividad de tipo protectora que se analizará mediante un ensayo de actividad bactericida. Además con los perfiles electroforéticos del LPS de E. coli O157, S. Urbana, S. Arizonae y los serogrupos de E. coli O7 y O116, se pretende identificar la región del LPS a la que pertenecen los mimotopos seleccionados._x000D_ Con los resultados obtenidos la siguiente fase del proyecto consistirá realizar ensayos in vitro y en modelo animal para demostrar que los anticuerpos anti-mimotopos del LPS O157 tienen la propiedad de neutralizar el efecto endotóxico de los LPS de diferentes enterobacterias. En forma conjunta se desarrollara un modelo animal de ensayos de desafío/protección empleando como inmunógenos los péptidos-mimotopos sintéticos del LPS O157. Los resultados positivos en estos ensayos confirmarán que se cuenta con un inmunógeno polivalente con propiedades inmunogénicas, con el que se podrá desarrollar una vacuna protectora contra enterobacterias de interés médico y epidemiológico._x000D_
Tema
Respuesta inmune contra patógenos entéricos; Biología celular y microbiología
Identificador global
http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN218311

Enlaces