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506.#.#.a: Público

650.#.4.x: Medicina y Ciencias de la Salud

336.#.#.b: other

336.#.#.3: Registro de colección de proyectos

336.#.#.a: Registro de colección universitaria

351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)

351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales

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270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

590.#.#.c: Otro

270.#.#.d: MX

270.1.#.d: México

590.#.#.b: Concentrador

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883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

590.#.#.a: Administración central

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883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios

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100.1.#.a: Francisco Suárez Güemes

524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Comportamiento in vitro e in vivo de dos cepas mutantes de Brucella melitensis, como inmunógenos en el modelo caprino", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

720.#.#.a: Francisco Suárez Güemes

245.1.0.a: Comportamiento in vitro e in vivo de dos cepas mutantes de Brucella melitensis, como inmunógenos en el modelo caprino

502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México

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506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2011, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx

041.#.7.h: spa

500.#.#.a: La brucelosis producida por Brucella melitensis (B. melitensis) es una infección predominante en pequeños rumiantes (especies caprina y ovina). Debido a que es una de las principales zoonosis esta enfermedad es controlada en los animales por la vacuna viva atenuda B. melitensis Rev1 con buena eficiencia probada en campo, además de ser estable genéticamente.Adicionalmente, la cepa vacunal Rev1, presenta varios inconvenientes, principalmente por la virulencia residual en cabras, que en ocasiones provoca abortos y que además no previene la diseminación de B. melitensis en una región enzootica. En el caso específico de la enfermedad en humanos la cepa Rev1 permanece plenamente virulenta y es resistente a estreptomicina (uno de los antibióticos de elección para tratar la brucelosis humana. _x000D_ Nuestro grupo de trabajo ha investigado algunos genes relacionados a la virulencia de esta especie. El resultado de estas investigaciones ha mostrado que la cepa mutante B. melitensis invA-km (cuyo genoma tiene el gen BMEI0215 interrumpido por la inserción del gen de resistencia a kanamicina) está atenuada en el modelo de infección celular in vitro. El desarrollo de la investigación actual se encuentra en comprobar la atenuación en el modelo in vivo utilizando el modelo murino, además de evaluar la capacidad inmunogénica de esta cepa. Debido a las investigaciones realizadas sobre la cepa Rev 1 y a las características del gen invA (BMEI0215), se plantea la posibilidad de eliminar los inconvenientes en el uso de esta cepa vacunal. El presente trabajo contempla la realización de la cepa mutante Brucella melitensis Rev1 invA-km y compararla con la cepa B. melitensis 133 invA-km que forma parte de nuestro cepario, así como la cepa vacunal Rev 1._x000D_ _x000D_ El objetivo de la presente propuesta es conocer el comportamiento de dos cepas mutantes en el gen invA de Brucella melitensis en estudios in vitro e in vivo en el modelo caprino, con el fin de evaluar su posible uso como inmunógeno. _x000D_ _x000D_ Objetivos específicos._x000D_ 1. Elaborar la mutante invA de Brucella melitensis, a partir de la cepa vacunal Rev 1._x000D_ 2. Evaluación de la supervivencia y replicación intracelular de las mutantes InvA de la cepa Rev 1 de B. melitensis, en la línea celular de macrófagos murinos J774A.1, a diferentes tiempos post-infección, para establecer la participación de este gen en la invasión y en el tránsito intracelular._x000D_ 3. Evaluación de la inducción de la respuesta inmune humoral y celular, en el modelo caprino, estimulada por dos mutantes invA de Brucella melitensis: La mutante invA, elaborada a partir de la cepa virulenta de campo 133, que ya se tiene en nuestro laboratorio y la mutante invA de la cepa Rev 1 de B. melitensis._x000D_ 4. Evaluar la protección conferida por las cepas mutantes de invA, frente al desafío experimental de una cepa de campo, en cabras gestantes._x000D_ _x000D_ Para cumplir los objetivos arriba planteados, el primer año del estudio se enfocará a la elaboración de la mutante Bm Rev1-invA. En nuestro laboratorio se cuenta con la mutante Bm 133 invA-km, que ha demostrado ser atenuada in vitro y resultados preliminares indican que también es atenuada en el modelo murino._x000D_ _x000D_ Durante el segundo año se probarán las dos mutantes en el modelo caprino. Se utilizarán cuatro grupos de cabras que serán inmunizadas y posteriormente serán sincronizadas para poder gestarlas. Después de esto serán desafiadas con una cepa virulenta de campo para verificar la protección de las cepas mutantes ante el desafío, la virulencia residual de las mismas cepas mutantes y la protección al aborto. Los animales serán sacrificados y se tomarán muestras de tejidos para aislamiento bacteriológico y sangre y suero para las pruebas de las respuestas de tipo humoral y celular._x000D_ _x000D_ Durante el tercer año se harán las pruebas de inmunidad humoral y celular, a partir de las muestras tomadas de las cabras, durante el período de inmunización y desafío._x000D_ Se realizará la prueba de ELISA para evaluar la respuesta inmune humoral. _x000D_ Se verificará por PCR tiempo real la inducción de citocinas representativas de la respuesta de tipo humoral (Th2), caracterizada por la producción de IL4, IL10 y TGF-beta. También la respuesta de tipo celular (Th1) en la que se ve estimulada la producción de INF-gamma, IL12 y TNF-alfa._x000D_ _x000D_ Se obtendrán los siguientes productos:_x000D_ una cepa mutante Bm Rev1-invA_x000D_ una tesis de doctorado_x000D_ dos tesis de maestría _x000D_ una tesis de licenciatura_x000D_ _x000D_ Una cepa atenuada de B. melitensis,candidata a vacuna, con posibilidad de ser patentada.

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No entro en nada

No entro en nada 2

Registro de colección universitaria

Comportamiento in vitro e in vivo de dos cepas mutantes de Brucella melitensis, como inmunógenos en el modelo caprino

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

Licencia de uso

Procedencia del contenido

Entidad o dependencia
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNAM
Entidad o dependencia
Dirección General de Asuntos del Personal Académico
Acervo
Colecciones Universitarias Digitales
Repositorio
Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
Contacto
Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

Cita

Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Comportamiento in vitro e in vivo de dos cepas mutantes de Brucella melitensis, como inmunógenos en el modelo caprino", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

Descripción del recurso

Título
Comportamiento in vitro e in vivo de dos cepas mutantes de Brucella melitensis, como inmunógenos en el modelo caprino
Colección
Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
Responsable
Francisco Suárez Güemes
Fecha
2011
Descripción
La brucelosis producida por Brucella melitensis (B. melitensis) es una infección predominante en pequeños rumiantes (especies caprina y ovina). Debido a que es una de las principales zoonosis esta enfermedad es controlada en los animales por la vacuna viva atenuda B. melitensis Rev1 con buena eficiencia probada en campo, además de ser estable genéticamente.Adicionalmente, la cepa vacunal Rev1, presenta varios inconvenientes, principalmente por la virulencia residual en cabras, que en ocasiones provoca abortos y que además no previene la diseminación de B. melitensis en una región enzootica. En el caso específico de la enfermedad en humanos la cepa Rev1 permanece plenamente virulenta y es resistente a estreptomicina (uno de los antibióticos de elección para tratar la brucelosis humana. _x000D_ Nuestro grupo de trabajo ha investigado algunos genes relacionados a la virulencia de esta especie. El resultado de estas investigaciones ha mostrado que la cepa mutante B. melitensis invA-km (cuyo genoma tiene el gen BMEI0215 interrumpido por la inserción del gen de resistencia a kanamicina) está atenuada en el modelo de infección celular in vitro. El desarrollo de la investigación actual se encuentra en comprobar la atenuación en el modelo in vivo utilizando el modelo murino, además de evaluar la capacidad inmunogénica de esta cepa. Debido a las investigaciones realizadas sobre la cepa Rev 1 y a las características del gen invA (BMEI0215), se plantea la posibilidad de eliminar los inconvenientes en el uso de esta cepa vacunal. El presente trabajo contempla la realización de la cepa mutante Brucella melitensis Rev1 invA-km y compararla con la cepa B. melitensis 133 invA-km que forma parte de nuestro cepario, así como la cepa vacunal Rev 1._x000D_ _x000D_ El objetivo de la presente propuesta es conocer el comportamiento de dos cepas mutantes en el gen invA de Brucella melitensis en estudios in vitro e in vivo en el modelo caprino, con el fin de evaluar su posible uso como inmunógeno. _x000D_ _x000D_ Objetivos específicos._x000D_ 1. Elaborar la mutante invA de Brucella melitensis, a partir de la cepa vacunal Rev 1._x000D_ 2. Evaluación de la supervivencia y replicación intracelular de las mutantes InvA de la cepa Rev 1 de B. melitensis, en la línea celular de macrófagos murinos J774A.1, a diferentes tiempos post-infección, para establecer la participación de este gen en la invasión y en el tránsito intracelular._x000D_ 3. Evaluación de la inducción de la respuesta inmune humoral y celular, en el modelo caprino, estimulada por dos mutantes invA de Brucella melitensis: La mutante invA, elaborada a partir de la cepa virulenta de campo 133, que ya se tiene en nuestro laboratorio y la mutante invA de la cepa Rev 1 de B. melitensis._x000D_ 4. Evaluar la protección conferida por las cepas mutantes de invA, frente al desafío experimental de una cepa de campo, en cabras gestantes._x000D_ _x000D_ Para cumplir los objetivos arriba planteados, el primer año del estudio se enfocará a la elaboración de la mutante Bm Rev1-invA. En nuestro laboratorio se cuenta con la mutante Bm 133 invA-km, que ha demostrado ser atenuada in vitro y resultados preliminares indican que también es atenuada en el modelo murino._x000D_ _x000D_ Durante el segundo año se probarán las dos mutantes en el modelo caprino. Se utilizarán cuatro grupos de cabras que serán inmunizadas y posteriormente serán sincronizadas para poder gestarlas. Después de esto serán desafiadas con una cepa virulenta de campo para verificar la protección de las cepas mutantes ante el desafío, la virulencia residual de las mismas cepas mutantes y la protección al aborto. Los animales serán sacrificados y se tomarán muestras de tejidos para aislamiento bacteriológico y sangre y suero para las pruebas de las respuestas de tipo humoral y celular._x000D_ _x000D_ Durante el tercer año se harán las pruebas de inmunidad humoral y celular, a partir de las muestras tomadas de las cabras, durante el período de inmunización y desafío._x000D_ Se realizará la prueba de ELISA para evaluar la respuesta inmune humoral. _x000D_ Se verificará por PCR tiempo real la inducción de citocinas representativas de la respuesta de tipo humoral (Th2), caracterizada por la producción de IL4, IL10 y TGF-beta. También la respuesta de tipo celular (Th1) en la que se ve estimulada la producción de INF-gamma, IL12 y TNF-alfa._x000D_ _x000D_ Se obtendrán los siguientes productos:_x000D_ una cepa mutante Bm Rev1-invA_x000D_ una tesis de doctorado_x000D_ dos tesis de maestría _x000D_ una tesis de licenciatura_x000D_ _x000D_ Una cepa atenuada de B. melitensis,candidata a vacuna, con posibilidad de ser patentada.
Tema
Microbiología; Zootecnia, veterinaria y acuacultura
Identificador global
http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IT222511

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