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506.#.#.a: Público

650.#.4.x: Biotecnología y Ciencias Agropecuarias

336.#.#.b: other

336.#.#.3: Registro de colección de proyectos

336.#.#.a: Registro de colección universitaria

351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)

351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales

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270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

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270.1.#.d: México

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883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios

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100.1.#.a: Roberto Carlos Muñoz Garay

524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Análisis de los flujos iónicos a través de la toxina formadora de poro Cry1Ab y la función de estos iones como iniciadores de la respuesta intracelular de defensa", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

720.#.#.a: Roberto Carlos Muñoz Garay

245.1.0.a: Análisis de los flujos iónicos a través de la toxina formadora de poro Cry1Ab y la función de estos iones como iniciadores de la respuesta intracelular de defensa

502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México

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264.#.1.c: 2012

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653.#.#.a: Electrofisiología e imagen; Biología celular y microbiología

506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2012, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx

041.#.7.h: spa

500.#.#.a: Las toxinas (Txs) Cry de Bacillus thuriengiensis son proteínas con actividad insecticida que se han empleado para el control de plagas de insectos. Estas Txs tienen su efecto al formar poros iónicos en la microvellosidad del epitelio intestinal. El poro formado tiene escasa selectividad iónica que genera un desbalance osmótico provocando la muerte de la célula. Nosotros hemos caracterizado electrofisiológicamente esta actividad tanto en membranas de epitelio como en membranas modelo, demostrando que la actividad es dependiente del correcto procesamiento y formación del oligómero._x000D_ _x000D_ En el caso de Txs formadoras de poro (TFP) con actividad en mamífero se ha analizado la respuesta celular empleada para subsanar el daños en membrana generado por la Tx. En el caso de aerolisina, alfatoxina, listeriolisina O, neumolisina y hemolisina se reporto la activación de vías de señalización como apoptosis, proliferación, sobrevivencia, respuestas tipo inflamatorias y autofagia, respectivamente, en función de la concentración de Tx y tipo celular empleado. En otros experimentos el análisis celular se realiza durante el tiempo que la célula se recupera del daño transitorio, luego de que la toxina se retiro minutos despues de su aplicación, En estos estudios algunas cinasas activadas por mitógeno (MAPKs) cambian sus patrones de fosforilación, entre ellas; ERK1/2, JNK pan, MEK1/2, MSK1/2, CREB, eIF2alfa, AMPKalfa, GCN2 y p38. Lo interesante de esta caracterización es que para todos los casos la respuesta intracelular y fosforilación es dependiente del flujo de K+. Por lo que se ha propuesto a K+ como el regulador maestro de la respuesta general de la célula a daño por TFP, sin saberse como puede ejercer su efecto._x000D_ _x000D_ Para las Txs Cry la respuesta celular no se ha analizado. Existen reportes sobre larvas de Aedes aegypti y Manduca sexta expuestas a concentraciones subletales mostraron cambios en niveles de la expresión de P38 e hipersensibilidad en larvas tratadas con RNAi de p38. Por otro lado, la toxina Cry5Aa en el nematodo C. elegans activa una vía de respuesta celular que involucra p38, SEK-1 y JNK. En una línea celular expresando heterólogamente al receptor caderina se sugiere que la respuesta es de muerte necrotica dependiente de Mg2+ y adenilil ciclasa/PKA._x000D_ _x000D_ Nosotros analizaremos la respuesta celular inducida por Cry1Ab en la línea celular Cf-1 (lepidóptero) que es sensible a la Tx. Nuestra hipótesis es que K+ iones actúa como regulador maestro al cambiar su gradiente electroquímico y activar las bombas ATPasas Na+-K+ y la de Ca2+. Esto cambia la relación ATP/AMP y activa AMPka2. Además un mecanismos de regulación por contacto directo de la ATPasa Na+-K+ sobre la cinasa Src se ha reportado recientemente. Src es un regulador de la vía de activación de ERK1/2 y al igual que AMPKa2 su fosforilación es dependiente del eflujo de K+ en respuesta a TFP._x000D_ _x000D_ El análisis de la respuesta celular será global: 1)analizando cambios intracelulares de pH, Ca2+, K+, Na+ mediante adquisición de imagen por epifluorescencia con indicadores fluorescentes y resolución temporal, 2)Establecimiento de patrones de fosforilación de las MAKPs referidas arriba, mediante “western blot” con anticuerpos comerciales, 3)Empleo de inhibidores y activadores de vías de señalización previamente reportadas en respuesta a TFP así como de la ATPasa NA+-K+, para estudiar cambios de sensibilidad a la Tx que permitan sugerir una participación de la vía.

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No entro en nada

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Registro de colección universitaria

Análisis de los flujos iónicos a través de la toxina formadora de poro Cry1Ab y la función de estos iones como iniciadores de la respuesta intracelular de defensa

Instituto de Biotecnología, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

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Procedencia del contenido

Entidad o dependencia
Instituto de Biotecnología, UNAM
Entidad o dependencia
Dirección General de Asuntos del Personal Académico
Acervo
Colecciones Universitarias Digitales
Repositorio
Contacto
Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

Cita

Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Análisis de los flujos iónicos a través de la toxina formadora de poro Cry1Ab y la función de estos iones como iniciadores de la respuesta intracelular de defensa", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

Descripción del recurso

Título
Análisis de los flujos iónicos a través de la toxina formadora de poro Cry1Ab y la función de estos iones como iniciadores de la respuesta intracelular de defensa
Colección
Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
Responsable
Roberto Carlos Muñoz Garay
Fecha
2012
Descripción
Las toxinas (Txs) Cry de Bacillus thuriengiensis son proteínas con actividad insecticida que se han empleado para el control de plagas de insectos. Estas Txs tienen su efecto al formar poros iónicos en la microvellosidad del epitelio intestinal. El poro formado tiene escasa selectividad iónica que genera un desbalance osmótico provocando la muerte de la célula. Nosotros hemos caracterizado electrofisiológicamente esta actividad tanto en membranas de epitelio como en membranas modelo, demostrando que la actividad es dependiente del correcto procesamiento y formación del oligómero._x000D_ _x000D_ En el caso de Txs formadoras de poro (TFP) con actividad en mamífero se ha analizado la respuesta celular empleada para subsanar el daños en membrana generado por la Tx. En el caso de aerolisina, alfatoxina, listeriolisina O, neumolisina y hemolisina se reporto la activación de vías de señalización como apoptosis, proliferación, sobrevivencia, respuestas tipo inflamatorias y autofagia, respectivamente, en función de la concentración de Tx y tipo celular empleado. En otros experimentos el análisis celular se realiza durante el tiempo que la célula se recupera del daño transitorio, luego de que la toxina se retiro minutos despues de su aplicación, En estos estudios algunas cinasas activadas por mitógeno (MAPKs) cambian sus patrones de fosforilación, entre ellas; ERK1/2, JNK pan, MEK1/2, MSK1/2, CREB, eIF2alfa, AMPKalfa, GCN2 y p38. Lo interesante de esta caracterización es que para todos los casos la respuesta intracelular y fosforilación es dependiente del flujo de K+. Por lo que se ha propuesto a K+ como el regulador maestro de la respuesta general de la célula a daño por TFP, sin saberse como puede ejercer su efecto._x000D_ _x000D_ Para las Txs Cry la respuesta celular no se ha analizado. Existen reportes sobre larvas de Aedes aegypti y Manduca sexta expuestas a concentraciones subletales mostraron cambios en niveles de la expresión de P38 e hipersensibilidad en larvas tratadas con RNAi de p38. Por otro lado, la toxina Cry5Aa en el nematodo C. elegans activa una vía de respuesta celular que involucra p38, SEK-1 y JNK. En una línea celular expresando heterólogamente al receptor caderina se sugiere que la respuesta es de muerte necrotica dependiente de Mg2+ y adenilil ciclasa/PKA._x000D_ _x000D_ Nosotros analizaremos la respuesta celular inducida por Cry1Ab en la línea celular Cf-1 (lepidóptero) que es sensible a la Tx. Nuestra hipótesis es que K+ iones actúa como regulador maestro al cambiar su gradiente electroquímico y activar las bombas ATPasas Na+-K+ y la de Ca2+. Esto cambia la relación ATP/AMP y activa AMPka2. Además un mecanismos de regulación por contacto directo de la ATPasa Na+-K+ sobre la cinasa Src se ha reportado recientemente. Src es un regulador de la vía de activación de ERK1/2 y al igual que AMPKa2 su fosforilación es dependiente del eflujo de K+ en respuesta a TFP._x000D_ _x000D_ El análisis de la respuesta celular será global: 1)analizando cambios intracelulares de pH, Ca2+, K+, Na+ mediante adquisición de imagen por epifluorescencia con indicadores fluorescentes y resolución temporal, 2)Establecimiento de patrones de fosforilación de las MAKPs referidas arriba, mediante “western blot” con anticuerpos comerciales, 3)Empleo de inhibidores y activadores de vías de señalización previamente reportadas en respuesta a TFP así como de la ATPasa NA+-K+, para estudiar cambios de sensibilidad a la Tx que permitan sugerir una participación de la vía.
Tema
Electrofisiología e imagen; Biología celular y microbiología
Identificador global
http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN207712

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