dor_id: 1500921

506.#.#.a: Público

650.#.4.x: Medicina y Ciencias de la Salud

336.#.#.b: other

336.#.#.3: Registro de colección de proyectos

336.#.#.a: Registro de colección universitaria

351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)

351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales

harvesting_group: ColeccionesUniversitarias

270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

590.#.#.c: Otro

270.#.#.d: MX

270.1.#.d: México

590.#.#.b: Concentrador

883.#.#.u: https://datosabiertos.unam.mx/

883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

590.#.#.a: Administración central

883.#.#.1: http://www.ccud.unam.mx/

883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios

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100.1.#.a: Stephanie Colette Thebault

524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Análisis de la(s) vía(s) de señalización intracelular involucrada(s) en el efecto anti angiogénico de las vasoinhibinas: implicación de la regulación de la homeostasis de calcio por los canales TRP Transient Receptor Potential", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

720.#.#.a: Stephanie Colette Thebault

245.1.0.a: Análisis de la(s) vía(s) de señalización intracelular involucrada(s) en el efecto anti angiogénico de las vasoinhibinas: implicación de la regulación de la homeostasis de calcio por los canales TRP Transient Receptor Potential

502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México

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264.#.0.c: 2009

264.#.1.c: 2009

307.#.#.a: 2019-05-23 18:40:21.491

653.#.#.a: Fisiología; Biomedicina

506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2009, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx

041.#.7.h: spa

500.#.#.a: Las vasoinhibinas son una familia de péptidos derivados de la hormona prolactina que inhiben la angiogénesis y la vasodilatación, y promueven la apoptosis de células endoteliales. Estudios recientes apoyan la participación de las vasoinhibinas en la vascularización reducida del ojo, así como su posible participación en enfermedades oculares angiogénico-dependientes que incluye a la retinopatía diabética, la cual es la causa más frecuente de ceguera en los adultos a nivel mundial. Sin embargo, es poco lo que se sabe acerca de los mecanismos intracelulares que median las acciones vasculares de las vasoinhibinas tanto en condiciones fisiológicas como patológicas. Se ha mostrado que las vasoinhibinas pueden prevenir el efecto proangiogénico y vasodilatador del factor de crecimiento vascular y de la bradicidina, respectivamente, mediante la inhibición de la producción de oxido nítrico (NO) endotelial vía la regulación del calcio intracelular in vitro. Las características de las señales de calcio intracelular (amplitud, localización, duración etc.) inducidas por factores intra- y/o extracelulares conllevan a la ejecución de acciones como son la proliferación o la apoptosis. Asimismo, se sabe que el endotelio expresa varios tipos de canales membranales de calcio y diversas evidencias sugieren que los canales de calcio de tipo TRP ("Transient Receptor Potential") desempeñan un papel esencial en el control del influjo de calcio a las células endoteliales, con el fin potencial de controlar efectos vasculares como la angiogénesis. No obstante aún no se ha dilucidado la participación de estos canales en la señalización intracelular de las vasoinhibinas, y en particular en sus efectos antiangiogénicos mediante la inhibición de la vía de la bradicidina, la cual se ha encontrado sobre-activada en vítreos de pacientes con retinopatía diabética proliferativa en un estudio proteómico reciente. En este proyecto proponemos que las vasoinhibinas pueden ejercer sus acciones anti-angiogénicas por parte vía la inhibición de la proliferación endotelial inducida por la bradicidina (resultados preliminares), mediante la regulación de la homeostasis del calcio, y por ende del NO, a través de los canales TRP. Analizaremos si las vasoinhibinas inhiben la activación de la fosfolipasa C beta y la subsiguiente producción de inositol trifosfato (IP3) inducida por la estimulación del receptor de la bradicidina (mediante estuches comerciales). Además se sabe que poblaciones específicas de canales TRP pueden activarse por la liberación de calcio intracelular a través del IP3. Al respeto, hemos encontrado como resultado preliminar que la bradicidina (por 48 horas, a una dosis que estimula la proliferación endotelial) incrementa la expresión del canal TRPC5 por RT-PCR convencional en células endoteliales, y que las vasoinhibinas revierten dicho efecto. Queremos corroborar que se modifica la expresión del canal TRPC5 mediante las técnicas de RT-PCR en tiempo real y de Western-blot. Investigaremos si la inhibición de la expresión de los canales TRPC5 por ARN de interferencia (ARNi) previene el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre el influjo de calcio inducido por bradicidina, a través de la técnica de medición de calcio intracelular por sonda fluorescente. Además, se conoce que el influjo de calcio puede regular la producción de NO por la sintasa endotelial (eNOS) al unirse a la proteína calmodulina. Por consiguiente, determinaremos si la inhibición de la expresión de los canales TRPC5, sugeridos por los experimentos de ARNi antes propuestos, previene el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre la activación de la eNOS (método de citrulina radioactiva) y su fosforilación (Western-blot) inducida por bradicidina en células endoteliales in vitro. Asimismo, dependiendo de los resultados de los experimentos previamente mencionados, analizaremos si la inhibición de la fosfolipasa C (por el agente farmacológico U73122), la inhibición del influjo de calcio intracelular (por EDTA o heparina), el bloqueo de la expresión de los TRPC5 (por ARNi), y la inhibición de la actividad de eNOS (por L-NAME) previenen el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre la proliferación endotelial inducida por la bradicidina (incorporación de timidina tritiada y ensayo colorimétrico) en células endoteliales en cultivo. Finalmente, proponemos evaluar si la bradicidina puede ejercer una acción proangiogénica en retinas de ratas inyectadas intravitrealmente con bradicidina, y determinar si las vasoinhibinas pueden inhibir dicho efecto in vivo (a través de determinar el número y densidad vascular mediante el sistema ScanScope). Estos experimentos nos ayudarán en determinar si el calcio intracelular a través de los canales TRPC5 media las propiedades antiangiogénicas de las vasoinhibinas, y nos permitirán comprender mejor los mecanismos de acción de las vasoinhibinas en condiciones normales y en la retinopatía diabética.

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No entro en nada

No entro en nada 2

Registro de colección universitaria

Análisis de la(s) vía(s) de señalización intracelular involucrada(s) en el efecto anti angiogénico de las vasoinhibinas: implicación de la regulación de la homeostasis de calcio por los canales TRP Transient Receptor Potential

Instituto de Neurobiología, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias

Licencia de uso

Procedencia del contenido

Entidad o dependencia
Instituto de Neurobiología, UNAM
Entidad o dependencia
Dirección General de Asuntos del Personal Académico
Acervo
Colecciones Universitarias Digitales
Repositorio
Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
Contacto
Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx

Cita

Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Análisis de la(s) vía(s) de señalización intracelular involucrada(s) en el efecto anti angiogénico de las vasoinhibinas: implicación de la regulación de la homeostasis de calcio por los canales TRP Transient Receptor Potential", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.

Descripción del recurso

Título
Análisis de la(s) vía(s) de señalización intracelular involucrada(s) en el efecto anti angiogénico de las vasoinhibinas: implicación de la regulación de la homeostasis de calcio por los canales TRP Transient Receptor Potential
Colección
Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
Responsable
Stephanie Colette Thebault
Fecha
2009
Descripción
Las vasoinhibinas son una familia de péptidos derivados de la hormona prolactina que inhiben la angiogénesis y la vasodilatación, y promueven la apoptosis de células endoteliales. Estudios recientes apoyan la participación de las vasoinhibinas en la vascularización reducida del ojo, así como su posible participación en enfermedades oculares angiogénico-dependientes que incluye a la retinopatía diabética, la cual es la causa más frecuente de ceguera en los adultos a nivel mundial. Sin embargo, es poco lo que se sabe acerca de los mecanismos intracelulares que median las acciones vasculares de las vasoinhibinas tanto en condiciones fisiológicas como patológicas. Se ha mostrado que las vasoinhibinas pueden prevenir el efecto proangiogénico y vasodilatador del factor de crecimiento vascular y de la bradicidina, respectivamente, mediante la inhibición de la producción de oxido nítrico (NO) endotelial vía la regulación del calcio intracelular in vitro. Las características de las señales de calcio intracelular (amplitud, localización, duración etc.) inducidas por factores intra- y/o extracelulares conllevan a la ejecución de acciones como son la proliferación o la apoptosis. Asimismo, se sabe que el endotelio expresa varios tipos de canales membranales de calcio y diversas evidencias sugieren que los canales de calcio de tipo TRP ("Transient Receptor Potential") desempeñan un papel esencial en el control del influjo de calcio a las células endoteliales, con el fin potencial de controlar efectos vasculares como la angiogénesis. No obstante aún no se ha dilucidado la participación de estos canales en la señalización intracelular de las vasoinhibinas, y en particular en sus efectos antiangiogénicos mediante la inhibición de la vía de la bradicidina, la cual se ha encontrado sobre-activada en vítreos de pacientes con retinopatía diabética proliferativa en un estudio proteómico reciente. En este proyecto proponemos que las vasoinhibinas pueden ejercer sus acciones anti-angiogénicas por parte vía la inhibición de la proliferación endotelial inducida por la bradicidina (resultados preliminares), mediante la regulación de la homeostasis del calcio, y por ende del NO, a través de los canales TRP. Analizaremos si las vasoinhibinas inhiben la activación de la fosfolipasa C beta y la subsiguiente producción de inositol trifosfato (IP3) inducida por la estimulación del receptor de la bradicidina (mediante estuches comerciales). Además se sabe que poblaciones específicas de canales TRP pueden activarse por la liberación de calcio intracelular a través del IP3. Al respeto, hemos encontrado como resultado preliminar que la bradicidina (por 48 horas, a una dosis que estimula la proliferación endotelial) incrementa la expresión del canal TRPC5 por RT-PCR convencional en células endoteliales, y que las vasoinhibinas revierten dicho efecto. Queremos corroborar que se modifica la expresión del canal TRPC5 mediante las técnicas de RT-PCR en tiempo real y de Western-blot. Investigaremos si la inhibición de la expresión de los canales TRPC5 por ARN de interferencia (ARNi) previene el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre el influjo de calcio inducido por bradicidina, a través de la técnica de medición de calcio intracelular por sonda fluorescente. Además, se conoce que el influjo de calcio puede regular la producción de NO por la sintasa endotelial (eNOS) al unirse a la proteína calmodulina. Por consiguiente, determinaremos si la inhibición de la expresión de los canales TRPC5, sugeridos por los experimentos de ARNi antes propuestos, previene el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre la activación de la eNOS (método de citrulina radioactiva) y su fosforilación (Western-blot) inducida por bradicidina en células endoteliales in vitro. Asimismo, dependiendo de los resultados de los experimentos previamente mencionados, analizaremos si la inhibición de la fosfolipasa C (por el agente farmacológico U73122), la inhibición del influjo de calcio intracelular (por EDTA o heparina), el bloqueo de la expresión de los TRPC5 (por ARNi), y la inhibición de la actividad de eNOS (por L-NAME) previenen el efecto inhibidor de las vasoinhibinas sobre la proliferación endotelial inducida por la bradicidina (incorporación de timidina tritiada y ensayo colorimétrico) en células endoteliales en cultivo. Finalmente, proponemos evaluar si la bradicidina puede ejercer una acción proangiogénica en retinas de ratas inyectadas intravitrealmente con bradicidina, y determinar si las vasoinhibinas pueden inhibir dicho efecto in vivo (a través de determinar el número y densidad vascular mediante el sistema ScanScope). Estos experimentos nos ayudarán en determinar si el calcio intracelular a través de los canales TRPC5 media las propiedades antiangiogénicas de las vasoinhibinas, y nos permitirán comprender mejor los mecanismos de acción de las vasoinhibinas en condiciones normales y en la retinopatía diabética.
Tema
Fisiología; Biomedicina
Identificador global
http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN202209

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